细胞免疫疗法的临床应用

细胞免疫疗法是本公司利用人的自体、同种异体或异体的体细胞，经体外操作培养后回输人体的治疗方法（如上图）。这种体外操作包括细胞在体外的传代、扩增、筛选以及药物或其它能改变细胞生物学行为的处理。经过体外操作后的体细胞可用于疾病的治疗。体细胞治疗具有多种不同的类型，包括体内回输体外激活的单个核白细胞和淋巴因子激活杀伤细胞（LAK）,肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）、单核细胞、巨噬细胞或体外致敏的杀伤细胞（IVS）等等；体内移植体外加工过的肿瘤细胞（瘤苗）；体内植入经体外操作过的细胞群如肝细胞、肌细胞、胰岛细胞、软骨细胞等等。由于体细胞治疗的最终制品不是某一种单一物质而是一类具有生物学效应的细胞，其制备技术和应用方案具有多样性，复杂性和特殊性，因此，不能像一般生物制品那样制定出适合于每一种方案的具体标准。只能根据患者病情决定具体治疗方案。

（一）肿瘤治疗：

肿瘤细胞免疫疗法全称肿瘤细胞生物基因免疫疗法，其作用不是杀死全部癌症细胞而是由于当癌症细胞负荷明显降低时，机体的免疫功能恢复后，通过清除微小的残留病灶或明显抑制了残留癌症细胞增殖的方式来达到治疗癌症的目的。癌症免疫治疗正是通过人为的干预，来调动机体自身的免疫系统对癌细胞进行杀灭和抑制其增殖。

肿瘤细胞免疫治疗是一种新兴的、具有显著疗效的肿瘤治疗模式，是一种自身免疫抗癌的新型治疗方法。它是运用生物技术和生物制剂对从病人体内采集的免疫细胞进行体外培养和扩增后回输到病人体内的方法，来激发，增强机体自身免疫功能，从而达到治疗肿瘤的目的。肿瘤细胞免疫疗法是继手术、放疗和化疗之后的第四大肿瘤治疗技术。

免疫系统是人体的防御体系，一方面发挥着清除细菌、病毒、外来异物的功能，另一方面消除体内衰老细胞以及发生突变的细胞(有的突变细胞会变成癌细胞)。机体免疫系统和癌细胞相互作用的结果决定了癌症的最终演变。对于健康的人来说，其免疫系统的强大足以及时清除突变的癌细胞。但对于癌细胞病人来说，普遍存在免疫系统低下，不能有效地识别、杀灭癌症细胞;另一方面，癌症细胞大量增殖，会进一步抑制患者的免疫功能，而且，癌症细胞有多种机制来逃脱免疫细胞的识别与杀伤，肿瘤细胞免疫治疗就是借助分子生物学技术和细胞工程技术，提高癌症的免疫原性，给机体补充足够数量的功能正常的免疫细胞和相关分子，激发和增强机体抗瘤免疫应答，提高癌症对机体抗癌症免疫效应的敏感性，在体内、外诱导癌症特异性和非特异性效应细胞和分子，达到最终清除癌症的目的。

肿瘤生物免疫治疗的效果很好，能维持体内环境的稳定性，促进正常的细胞代谢，没有化疗的不良负作用，达到从根本上治疗肿瘤的目的。从免疫学的角度来看，恶性肿瘤通常是由免疫系统的异常引起的。当免疫异常发生时，诱发人体自身产生大量具备免疫杀伤作用的特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL），直接抑制癌细胞的生成、诱导分化与凋亡，提高患者的免疫力，对肿瘤细胞进行精确性、特异性、靶向性、主动式攻击，杀灭体内的肿瘤细胞。

1、肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤，具体情况如下：

1-1、良性肿瘤：特点是膨胀性生长，所导致的症状与肿瘤位置有关，肿瘤逐渐增大可以压迫周围组织或器官，引起相应的压迫症状，比如子宫肌瘤；

1-2、恶性肿瘤：包括癌和肉瘤，癌来源于上皮组织，肉瘤来源于间叶组织，特点是浸润性生长，具有侵蚀性，因此肿瘤包膜不完整，可出现于全身各个部位。

2、具体操作：常用的肿瘤细胞免疫疗法就是用静脉抽血的方式，从患者体内抽血采集，80到150毫升的血液，进行体外分离、培养免疫细胞因子并激活，然后再通过静脉回输进入体内达到治疗目的。通过激发或调动机体内的免疫系统，增强肿瘤微环境的抗肿瘤免疫力，从而控制和杀伤肿瘤细胞，与传统治疗方式如手术、放化疗、靶向药直接攻击肿瘤的治疗原理不同。肿瘤免疫治疗是通过增强患者自身免疫力来治疗肿瘤。具有反应快、副作用小、疗效持久的特点，成为最有潜力治愈肿瘤的疗法。通过患者自身免疫系统识别肿瘤细胞所表达的肿瘤抗原，启动和激活T细胞，T细胞渗透至肿瘤部位并识别肿瘤细胞，然后直接杀死肿瘤细胞，现在的免疫治疗是通过抑制CTLA4和PD1重新启动患者自身的免疫功能，模式主要是抗PDL1以及抗CTLA4两个方向。

3、采用细胞生物免疫治疗技术，通过自身的淋巴细胞在体外培养活化倍增后再输入体内，调动自身免疫功能来杀灭肿瘤细胞，均无风险无免疫排斥，本公司已储备多种【肿瘤细胞免疫疗法】。归当然，万变不离其宗，都是利用肿瘤患者的自身免疫功能，体外培养免疫调节或抗体，以增加患者免疫细胞对肿瘤的识别、清除肿瘤。方法包括被动免疫、主动免疫和继承免疫治疗等等。在临床应用中有成功案例和技术积累，尤其对于恶性肿瘤的治疗效果比较明显。

4、过继性细胞免疫治疗、免疫检查点抑制治疗两类疗法在热度、临床试验、配套药物研发力度方面本项目都遥遥领先。除此以外，本项目核心技术团队还进一步优化了30年前发明的【IMF注射剂】，完善工艺，推出第二代【IMF免疫代谢因子复方注射剂】配合自体细胞免疫治疗技术临床应用，效果更好、治疗时间更短明显减轻患者痛苦，展示了本项目在抗肿瘤方面的强大技术优势。 总的来说，我们经过多年研究和临床试验后，已总结出完整的临床操作流程和内外结合治疗的 “组合拳”方案。分为：

4-1、上游免疫细胞的采集和细胞存储；

4-2、中游的细胞分离、培养、；

4-3、下游的临床应用和细胞诊疗。全产业链技术成熟，仪器设备易购，国家有政策，实施有队伍，完全具备立项申报条件，

5、适应症

肿瘤细胞免疫疗法适用于多种实体肿瘤，包括恶性黑色素瘤、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌、喉癌、鼻咽癌、胰腺癌等实体瘤手术后防止复发，也可以用于多发性骨髓瘤、B淋巴瘤和白血病等血液系统恶性肿瘤的复发，还可以用于上述肿瘤的进一步巩固治疗，达到延长生存期、提高生活质量和抑制肿瘤恶化的目的。但肿瘤细胞免疫治疗不适用于T细胞淋巴瘤患者、器官移植后长期使用免疫抑制药物和正在使用免疫抑制药物的自身免疫病患者。

6、细胞培养工艺流程：

细胞培养工艺流程就是对细胞进行体外培养、增殖和维持的一种技术，是现代生物技术和生物医学领域的重要基础实验技术。它可以用于分离、筛选、鉴定和培养各种细胞，为遗传工程、药物筛选和生物学研究提供了重要手段。我们以细胞培养工艺流程为主题，以肝癌细胞株HepG2的培养为例，介绍细胞培养的工艺流程。

6-1、细胞株的准备：

首先需要准备细胞株，比如肝癌细胞株HepG2。HepG2细胞属于人类肝细胞癌细胞系，是最常用的人类肝癌细胞株之一。HepG2细胞外形为六边形或多边形，细胞体积较大，细胞贴附性强，可以在无血清培养基中维持生长。在培养前需要将细胞株从低温冻存中解冻，将细胞悬液加入无血清培养基中培养。

6-2、细胞的培养和增殖：

细胞培养需要严格控制培养条件，包括培养基成分、培养温度、CO2浓度等。在本例中，HepG2细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养，温度为37℃，CO2浓度为5%。细胞培养的关键步骤是细胞传代，这是将细胞从原来的培养瓶中移入新的培养瓶中，以促进细胞的增殖和生长。在本例中，每3天进行一次细胞传代，将细胞从原来的250ml培养瓶中移入新的250ml培养瓶中，使其达到60-80%的密度，以保持细胞的健康生长。